猪附红细胞体病ELISA诊断试剂盒

猪附红细胞体是附着于猪红细胞表面的细胞外寄生虫，可以引起红细胞损伤和畸形。猪附红细胞体病急性临床症状为发热性急性贫血和低发病率、高死亡率的黄疸。慢性猪附红细胞体感染可引起母猪的繁殖效率降低，育肥猪生长迟缓，呼吸道和肠道疾病的发病率增加。还会与其他疾病产生交叉感染，使病情的诊治难度加大。近年来，该病已经给我国的养猪业造成了巨大的经济损失。目前，在基层依赖显微观察血液涂片染色的方法，仍然经常被应用在临床猪附红细胞体病的诊断上，但这种方法敏感性和特异性不高。

本项目利用基因工程技术，重组表达猪附红细胞体特异性表面蛋白基因，纯化重组蛋白。以该纯化蛋白为抗原，建立猪附红细胞体重组蛋白间接ELISA检测方法。由于用到的是病原体特异性基因的重组蛋白，因此该方法具有特异性强、重复性好、敏感性高等特点。此外，该方法属血清学检测方法，兼备低成本和高吞吐量的优越性。

对猪附红细胞体病ELISA诊断试剂盒的生产做了前期工作。前期工作中，已完成猪附红细胞体特异性表面蛋白基因的重组表达、鉴定和纯化，并进行了小试，试验结果表明正确，可大规模制备；通过对间接ELISA各反应条件的筛选，确定了该抗原的最适包被浓度，待检血清最适稀释度，二抗稀释度，底物最佳作用时间，得到了最优反应条件；通过进行特异性、重复性、敏感性以及临床血清样本的检测试验表明，该方法特异性强、重复性好、敏感性高、检测成本低、检测吞吐量高，适合规模化生产，推广应用。